Правила отбора и доставки проб патматериала в лабораторию

Правила отбора и доставки проб патматериала в лабораторию.

Во всех случаях взятия и пересылки материала специалист обязан руководствоваться изложенными ниже правилами, а также соответствующими инструкциями по борьбе с болезнями животных.

Взятие и пересылка патологического материала для бактериологического и

вирусологического исследований

Патологический материал необходимо брать стерильными инструментами в стерильную посуду. Поверхность органа (ткани), от которого берут патологический материал, на месте разреза следует обжечь над пламенем или прижечь нагретой металлической пластинкой.

Патологический материал должен быть взят как можно раньше после смерти животного, особенно в теплое время года, т.к. сразу же после заболевания (или впервые же 1-2 дня) барьерная роль кишечника значительно ослабевает, что наряду с повышенной проницаемостью кровеносных сосудов способствует диссиминации кишечной флоры.

Кроме того, по мере углубления инфекционного процесса количество вируса может снижаться в результате одновременного воздействия защитных сил организма.

Следует учитывать, что при многих вирусных инфекциях наблюдается феномен посмертной аутостерилизации, в результате чего вирус может быть вообще не обнаружен или его количество окажется очень незначительным.

Вторая причина необходимости экстренного взятия материала – избежать посмертных изменений в тканях, иначе они могут оказаться непригодными для бактериологических и вирусологических исследований.

Для вирусологических исследований желательно направлять пробы от животных в трех стадиях болезни:

• от больных с выраженной клиникой с указанием температуры, частоты пульса и дыхания (кровь, кость, лимфатические узлы и пораженные органы);

• от убитых в агонии (кровь, кость, лимфатические узлы и пораженные органы);

• от выздоравливающих животных (кровь).

Взятые пробы следует как можно быстрее поместить в условия, обеспечивающие замедление процессов разложения материала. Такие условия обеспечивают низкие температуры.

Если патологический материал невозможно доставить в лабораторию в течение ближайших 24-30 часов, его посылают только в консервированном виде.

Патологический материал (органы или их части) консервируют 30-50%-ным раствором химически чистого глицерина на физиологическом растворе. Физиологический раствор предварительно стерилизуют при 120⁰С в течение 30 мин.

Материал можно консервировать также в стерильном вазелиновом масле. Материал заливают консервирующей жидкостью в количестве 4-5 раз, превышающем его объем. Консервированные образцы желательно хранить в холодильнике.

Небольшие трупы (поросят, мелких животных можно посылать целиком во влагонепроницаемой таре).

Трубчатые кости посылают на исследование в целом виде, очищенными от мышц и сухожилий. Кости завертывают в марлю или полотно, смоченные дезинфицирующей жидкостью и пересылают в сейф - пакетах или в стерильных полиэтиленовых пакетах.

Кишечник перед посылкой для бактериологического и вирусологического исследований освобождают от фекальных масс, а концы кишечника перевязывают. На исследование посылают части кишечника с наиболее характерными патологическими изменениями.

Кишечник помещают в банки с 30%-ным водным раствором глицерина или насыщенным водным раствором поваренной соли. Объем консервирующей жидкости должен превышать объем взятого материала в 4-5 раз.

Кал для исследования отправляют в стерильных стаканах, пробирках, банках, которые закрывают пергаментной бумагой, пробками или в контейнерах.

Кал от трупов животных можно послать в отрезке невскрытого кишечника, завязанного с обоих концов, он должен быть доставлен в лабораторию не позднее 24 ч после его взятия.

Для исследования участков кожи берут наиболее пораженные ее кусочки размером 10x10 см и посылают в стерильной, герметически закупоренной посуде.

При взятии содержимого гигром (бурс) в области поражения выстригают шерсть, кожный покров дезинфицируют 70°-ным спиртом и обрабатывают 5%-ной настойкой йода. Затем стерильным шприцем с иглой большого диаметра делают пункцию, отсасывают содержимое гигромы и переносят его в стерильную пробирку с резиновой пробкой.

Перед взятием проб молока у коров вымя обмывают теплой водой, соски обрабатывают 70%-ным спиртом. Из каждой доли вымени берут последние порции молока по 10-15 мл в отдельные стерильные пробирки с резиновыми пробками.

У овец и коз пробы молока берут с помощью молочного катетера или путем пункции цистерны вымени. Для этого животное фиксируют в боковом положении, вымя у основания соска протирают 70%-ным спиртом или смазывают 5%-ной настойкой йода. Стерильным шприцем с иглой делают пункцию у основания соска. После попадания иглы в цистерну (о чем судят по свободному движению конца иглы) набирают в шприц молоко и переносят его в стерильную пробирку с резиновой пробкой.

Пробы мочи берут катетером в стерильную посуду. При его отсутствии мочу получают при естественном мочеиспускании или, вызывая последнее, раздражением наружных половых органов.

Пробы слизи из половых органов животных берут стерильным марлевым тампонам (см. приложение) при помощи специальных инструментов конструкции Павловского, Жавордова, Казеева, а также применяемых при искусственном осеменении коров шприца-катетера или полистироловой пипетки, соединенной со шприцем.

Для получения смывов слизистой оболочки носовой полости, половых органов, конъюнктивы и др. полость орошают стерильным физиологическим раствором или солевым раствором Хенкса (см. приложение) и собирают стекающий раствор в емкости.

Иногда для получения смывов в полость вводят стерильный ватный тампон, смоченный физиологическим или солевым сбалансированным раствором. Тампоном тщательно протирают слизистую, извлекают его и помещают во флаконы с аналогичным раствором.

Мазки из носа, полости рта, прямой кишки, клоаки у птиц и т.д. берут при помощи стерильных ватных тампонов на довольно длинных стерильных деревянных палочках. После взятия мазка тампон помещают в пробирку, заполненную соответствующей жидкостью.

Наиболее часто для этого используют реактив Хенкса с антибиотиками (пенициллин, стрептомицин, нистатин) и белковым стабилизатором, например с 0,5% желатина или 0,5-1% альбумина бычьей сыворотки.

Взятие и пересылка материала

для исследования на паразитарные заболевания

Гельминтозы

Для копрологического исследования на гельминтозы - пробы фекалий от крупного, мелкого рогатого скота и свиней (10 г) берут рукой в резиновой перчатке из прямой кишки от 10%-ного поголовья ферм, но не менее 30 проб от возрастной группы или от каждой дойной коровы. Пробы доставляют в лабораторию в целлофановых мешочках или пергаментной бумаге на краю которых ставят номер пробы, с сопроводительным документом, в котором указывают хозяйство (комплекс), отделение, цех, вид и количество животных в них, на какой гельминтоз исследовать и дату взятия проб. При направлении на исследование проб от коров номера (клички) на упаковке и в описи должны соответствовать. От трупов в лабораторию направляют содержимое тонкого кишечника.

От лошадей пробы фекалий берут от 5%-ного поголовья табуна, но не менее 25 проб.

Для прижизненной диагностики гельминтозов плотоядных в лабораторию направляют пробы свежих фекалий массой около 5 г отдельно от каждого животного, для посмертной – труп животного. Материал упаковывают во влагонепроницаемую тару и доставляют в лабораторию фекалии не позднее 24 часов после взятия, труп – не позднее 5 часов после гибели.

Для исследования на эхинококкоз, альвеококкоз в лабораторию направляют:

- от промежуточных хозяев (павших или убитых) - пораженные органы (печень, легкие, другие внутренние органы и ткани);

- от дефинитивных хозяев- пробы фекалий или тощую кишку с содержимым от павших или убитых животных.

Отобранный патологоанатомический материал упаковывают во влагонепроницаемую тару и доставляют в лабораторию в день отбора в течение 4-6 часов.

Для исследования на телязиоз в лабораторию направляют содержимое конъюктивального мешка, полученное после промывания из спринцовки 3%-ным раствором борной кислоты или физиологическим раствором. Отобранные пробы выливают в пробирки, закрывают резиновыми пробками и доставляют в лабораторию в день взятия.

Для исследования на акантоцефалезы в лабораторию направляют свежие фекалии (пробы берут от 10% поголовья свиней или от 5% поголовья птиц), содержимое кишечника от трупов свиней, трупы птиц целиком.

Протозоозы

В лабораторию для исследования на эймериозы направляют:

- от 20-30 подозреваемых в заболевании животных из прямой кишки пробы фекалий до 5 г;

- от павших или вынужденно убитых – отрезки пораженных тонких и толстых кишок, перевязанные с обоих концов;

- от пушных зверей, кроликов и птиц – групповые пробы фекалий или трупы целиком.

Отобранный патологический материал и пробы фекалий упаковывают во влагонепроницаемую тару и доставляют в лабораторию в день отбора, а трупы – не позднее 4-6 часов после гибели.

Для исследования на трипанозомоз (случную болезнь) лошадей в лабораторию направляют: соскобы со слизистой оболочки влагалища, мочеиспускательного канала, взятые уретральной ложкой; выпот из надрезов отеков и бляшек, собранный шприцом в стерильные пробирки; для реакции связывания комплемента сыворотку крови нативную или консервированную одним из общепринятых методов. Патологический материал доставляют в термосе со льдом и исследуют не позднее 6 часов, а сыворотку крови – не позднее 2 дней после взятия. Для микроскопического исследования на месте (в хозяйстве) делают раздавленные капли из экссудатов и соскобов.

Для микроскопического исследования Су-ауру (трипанозомоз) лошадей, собак приготовляют мазки и толстые капли крови из уха. Для установления диагноза необходимо материал брать повторно. В лабораторию направляют (или исследуют на месте) сыворотку крови или цельную кровь для исследования методом постановки формолреакции. От трупа берут кусочки селезенки, печени, почек, костного мозга и лимфатических узлов, делают мазки и посылают в лабораторию. Мазки готовят не позже чем через 6-12 часов после смерти животного.

Кампилобактериоз (вибриоз)

Для бактериологического исследования в лабораторию направляют:

а) от коров, нетелей и овцематок - абортированный плод (целиком с плодными оболочками), а от особенно крупных плодов -голову, желудок, печень, легкие, плаценту (или часть ее). В случае непригодности плода, плодовых оболочек и плаценты для исследований в лабораторию направляют слизь из шейки матки, стерильно взятую впервые 3-4 дня после аборта (при отсутствии гнойных выделений из матки) или в период охоты. Слизь берут также от животных, у которых наблюдают расстройство полового цикла (в период охоты);

б) от быков и баранов - препуциальную слизь, сперму секрет придаточных половых желез, взятые с соблюдением правил асептики и антисептики. При исследовании быков обработку полости препуция бактерицидными средствами прекращают за 30 дней до исследования;

в) от животных, убитых с диагностической целью, влагалище, матку, лимфатические узлы тазовой полости.

Для исследования в реакции агглютинации берут цервиковагинальную слизь неоднократно перегуливающих коров и телок, не имеющих выделений из влагалища (гноя, крови и т.п).

Патологический материал доставляют в лабораторию в закрытой таре со льдом.

При отправке абортированных плодов следует иметь в виду, что они пригодны для исследования впервые 10-12 ч после аборта. При необходимости плоды замораживают и отправляют не позднее чем через двое суток после аборта.

Пробы спермы, секрета, препуциальной и влагалищной слизи, полученные от животных, транспортируют в термосе со льдом и доставляют в лабораторию не позднее 6 ч с момента взятия проб.

Упаковка и пересылка патологического материала

Трупы мелких животных, части трупов животных и отдельные органы в свежем (нефиксированном) виде отправляют для исследования в лабораторию только с нарочным.

Посылаемый материал должен быть тщательно упакован, чтобы предупредить возможность рассеивания инфекции в пути.

Упаковка должна быть трехслойной:

1) емкость, содержащая пробу, должна быть водонепроницаемой, а в случае использования подвижных буферных растворов - герметичной;

2) внутренняя упаковка должна быть водонепроницаемой с достаточным количеством поглощающего материала на случай утечки для впитывания всей жидкости, содержащейся в пробе (вата, бумага);

3) наружная упаковка предназначена для защиты внутренней от физических повреждений и воды (герметичный термоконтейнер).

При перевозке наиболее надежным способом консервирования вируссодержащих проб является их замораживание. При транспортировке проб на дальние расстояния следует использовать сухой лед. В качестве емкости для материала и льда используют пластмассовые контейнеры, легкие по массе, с хорошей теплоизоляцией, небьющиеся и прочные.

Следует избегать колебаний температуры, особенно резких ее перепадов, а также повторных замораживаний и оттаиваний. Температура является определяющим фактором, влияющим на выживаемость вируса во время перевозки. Титр вируса снижается очень быстро, если температура среды, в которой его транспортируют, поднимается выше 20⁰С; у большинства вирусов это снижение происходит настолько быстро, что превращает последующее выделение вируса в пустую трату времени.

Если замораживание невозможно, то следует использовать один из следующих консервирующих растворов (см. приложение)

Кроме правильно выбранного материала, взятого в подходящие сроки и пересланного с соблюдением необходимых условий, лаборатория нуждается в определенной информации, касающейся больного и диагностических проб. Вместе с пробами направлять подробное описание динамики заболевания животного (время появления, быстрота охвата, процент заболеваемости, наличие летальных исходов или тяжелых осложнений, период переболевания, клиническая картина, протокол вскрытия, чем лечили, прививали).

На взятый материал составляют сопроводительный документ (см. приложение)

Если при вскрытии посылки в лаборатории обнаруживается несоответствие сопроводительному документу или порча патологического материала, то обязательно составляют акт, копию которого отправляют ветеринарному врачу, направлявшему материал в лабораторию.

Отбор проб мозга для исследования на бешенство

При подозрении на бешенство необходимо, когда это возможно, присылать целую голову, ее следует упаковать во влагонепроницаемый пакет, поместить в металлический контейнер и доставить в лабораторию в более короткие сроки.

Отбирать пробы мозга необходимо строго соблюдать меры личной безопасности: надевать резиновые перчатки, халаты с нарукавниками, резиновый или полиэтиленовый фартук, резиновые сапоги, защитные очки, защитную маску на лицо.

Отделить голову от туловища и хорошо зафиксировать. Снять кожу и мышцы с черепной коробки, сделав надрезы между глазными впадинами и от них в сторону затылка. С помощью пилы, топора, ножниц и пинцета снять черепную коробку. Отделить основные нервы, изъять мозг и поместить его на кювету или доску. Отобрать пробы коры больших полушарий и основания спинного мозга.

Для исследования на бешенство необходимо брать пробы аммоновых рогов. Для этого нужно рассечь продольными разрезами каждое центральное полушарие на расстоянии 2 см (для собак) от средней линии мозга, удалить верхние части до щели (пространства), в котором находятся аммоновы рога, представляющие собой полуцилиндрические тела белого цвета.

Нужно взять несколько кусочков аммоновых рогов и основания спинного мозга. Общий вес каждой пробы должен быть 5-10 г. Пробы мозга для исследования на бешенство обычно консервируют глицерином и маркируют с пометкой «бешенство».

Вскрывать подозрительных на заболевание бешенством животных в полевых условиях запрещено!

Отбор проб мозга при прионных инфекциях(губкообразная энцефалпатия крупного рогатого скота, скрепи овец и коз, трансмиссивная энцефалопатия норок)

При выполнении работ по отделению, упаковке и транспортировке головы необходимо исключить травмирование рук и попадание брызг крови на кожу и в глаза. Чтобы избежать этого, надевают халат, прорезиненный фартук, анатомические перчатки из плотной резины, резиновые сапоги, водонепроницаемый капюшон и защитную маску из оргстекла, закрывающую лицо от брызг крови.

Голову отделяют от шеи по атланто-затылочному сочленению. С дорсальной части головы крупного рогатого скота удаляют кожу.

Далее зажимают голову в тиски, осторожно, чтобы не повредить мозг, распиливают лобную кость с помощью анатомической пилы (см. в приложении рис: разрез 1).

Затем производят надрезы лобной кости с каждой стороны от точек, находящихся на оси глазных ям, продлевая их каудально до наружных слуховых проходов. Продлевая эти разрезы каудально до большого затылочного отверстия также осторожно, чтобы исключить повреждение мозга (см. в приложении рис: разрез 2)..

Делают сагиттальный разрез посередине лобной и затылочной костей до большого затылочного отверстия (см. в приложении рис: разрез 3). Затем разделяют и удаляют распиленные левую и правую части черепной коробки. Рассекают и снимают твердую мозговую оболочку.

Перевернуть голову, чтобы под действием силы тяжести мозг отделился от основания черепа. Продолжить работу, продвигаясь от каудального надреза вперед; для перерезания нервов вентральной стороны черепа использовать скальпель.

Извлечь мозг целиком и поместить его в ударопрочную герметичную емкость с фиксирующим раствором (см. приложение), при этом объем раствора должен быть в 10 раз больше объема мозга.

По окончании работ инструменты, которыми проводили отделение и распил головы, укладывают в стерилизатор с 2%-ным раствором гипохлорита натрия не менее чем на 1 час (инструменты должны быть погружены в раствор полностью). Сапоги, фартук, капюшон, маску и перчатки обрабатывают 2%-ным раствором гипохлорита натрия (протереть раствором, оставить на 1 час, затем тщательно вымыть водой), халаты обрабатывают автоклавированием при 134-138⁰С в течение 20-30 минут, Горючие отходы сжигают.

Африканская чума свиней отбирают трубчатую кость и селезенку доставляют в замороженном виде в термоконтейнере (0+4⁰ С).

Классическая чума свиней отбирают трубчатую кость, селезенку, лимфоузлы доставляют в замороженном виде в термоконтейнере (0+4⁰ С).

Взятие крови для серологических исследований

Иглы перед взятием крови обязательно стерилизуют кипячением. Шерсть на месте взятия крови тщательно выстригают, а кожу дезинфицируют 70%-ным спиртом.

Нужно следить, чтобы кровь стекала в пробирку струей, а не каплями, кровь, взятая каплями и вспененная, скорее гемолизуется и часто дает неправильные результаты при исследовании.

У лошадей, крупного рогатого окота, овец и коз кровь берут из яремной вены в верхней трети шеи.

У свиней кровь берут из уха (иглой со шприцем), из кончика хвоста, из передней полой вены (лучше в спинном положении) или из глазной вены. Хвост предварительно обмывают водой с мылом и дезинфицируют 70%-ным спиртом. Затем кончик рассекают ножницами. После взятия крови кончик хвоста обрабатывают йодом, перевязывают или прижигают алюминевыми квасцами.

У птиц кровь берут из подкрыльцовой вены или из гребешка.

Кровь у лисиц и песцов берут из бедренной вены, у норок путем отсечения подушечки среднего пальца задней лапы: или кончика хвоста.

Брать кровь для получения сыворотки надо по возможности утром, до кормления животных. Для серологического исследования берут по 7-10 мл крови от крупного рогатого скота, лошадей, овец, свиней; от пушных зверей и птиц по 1-2 мл.

Сыворотку крови получают методом отстоя. Для свертывания крови и отстаивания сыворотки пробирки с кровью выдерживают 30-60 мин при 20-30°С или 37-38°С, сгусток крови от стенок отделяют стальной спицей, а затем пробирки выдерживают при 4-10°С 20-24 ч.

Отстоявшуюся сыворотку сливают в сухие стерильные пробирки, закрывают пробками и направляют в лабораторию в течение первых суток и в исключительных случаях не позднее третьего дня после взятия крови.

Мутные, проросшие, гемолизированные сыворотки исследованию не подлежат.

На каждой пробе крови или сыворотки указывают ее номер или кличку животного, или фамилию владельца животного.

Пробы направляют с сопроводительной в двух экземплярах (см.приложение)

Пробирки с кровью и сыворотками плотно закрывают стерильными пробками и устанавливают для пересылки в строго вертикальном положении.

Зимой сыворотки упаковывают и пересылают так, чтобы они не замерзли.

Взятие крови для гематологических исследований

Кровь для гематологических исследований берут из ярёмной или каудальной (хвостовой) вены в специальные системы забора крови с антикоагулянтом или в пробирки с антикоагулянтами. В качестве антикоагулянтов используют трилон Б (ЭДТА-динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты) из расчета 0,1 мл 10 %-ного раствора на 1 мл крови, гепарин (5ед. на 1 мл крови) или 6%-ный раствор лимоннокислого натрия (0,1 мл на 1 мл).

Для предотвращения свертывания крови содержимое пробирки сразу же тщательно перемешивают. Стабилизированную кровь до исследования хранят в холодильнике при температуре 2-4⁰С и исследуют не позднее, чем через 36 часов с момента взятия.

Пироплазмидозы и анаплазмозы.

В лабораторию для подтверждения диагноза на пироплазмоз, тейлериоз, франсаиеллез, бабезиоз, нутталлиоз, анаплазмозы направляют:

- от подозреваемых в заболевании или больных животных - тонкие мазки крови из периферических сосудов уха, хвоста или венчика, на тейлериоз дополнительно – мазки из пунктатов лимфатических узлов;

- от павших или убитых – часть печени, легких, селезенки, почки, сердца, головного мозга и лимфатические узлы.

Мазки крови берут в период развития симптомов болезни, при повышенной температуре, до применения специфического лечения. Перед отбором материала у животного шерсть на месте взятия крови выстригают, кожу тщательно протирают в начале ватным тампоном, смоченным в 70%-ном растворе спирта, а затем сухим. Стерильной иглой делают прокол вены ушной раковины или ножницами надрезают край верхушки уха или хвоста.

К свободно выступившей капле крови легко прикасаются поверхностью сухого обезжиренного предметного стекла. Затем стекло быстро поворачивают вверх каплей и удерживают пальцами левой руки в горизонтальном положении. Шлифованным краем другого предметного стекла или покровного стекла прикасаются к капле крови. Как только кровь равномерно распределится по ребру этого стекла, его быстро проводят по поверхности стекла справа налево под углом 45°. Ширина мазка должна быть уже предметного стекла. Для каждого нового мазка берут свежую каплю крови. От каждого животного готовят 2 мазка. Готовые мазки крови высушивают на воздухе. В холодное время года мазки делают в теплом помещении или на стеклах, подогретых на крышке стерилизатора. Правильно приготовленные мазки крови должны быть тонкие, равномерные, достаточной длины и заканчиваться за 0,5-1,0 см от края стекла.

При взятии пунктата из лимфатического узла животное хорошо фиксируют, на месте пункции выстригают шерсть, кожу протирают ватным тампоном, смоченным в растворе спирта или настойке йода. Левой рукой оттягивают лимфатический узел и удерживают большим и указательным пальцами левой руки. Затем вглубь узла вводят стерильную иглу, надевают на нее шприц и поршнем отсасывают лимфу. После шприц отсоединяют, иглу извлекают, а содержимое шприца выдавливают поршнем на предметное стекло, делая тонкие мазки, которые высушивают на воздухе.

На высушенных мазках крови и пунктата острым предметом или простым карандашом пишут номер, вид животного и дату приготовления мазка.

Материал от павших или убитых животных отбирают до наступления трупного окоченения.

Мазки упаковывают в чистую бумагу и доставляют в лабораторию в день отбора.

Для исследования животных на чесотку (накожниковую, зудневую и кожеедную) в лабораторию для микроскопического исследования доставляют соскобы с кожи. Для обнаружения накожников и зудней берут соскобы со свежих, неуплотнившихся очагов поражения (не менее чем с 2-3 мест на границе между пораженной и здоровой кожей, а для обнаружения кожеедов – в центре поражения). Перед взятием соскобов вокруг очага поражения выстригают шерсть. Для исследования на зудневую чесотку берут глубокие соскобы до появления сукровицы. Взятый материал помещают в баночку, плотно закрывают крышкой и

этикетируют с указанием наименования хозяйства, фермы, отары, номера животного, даты взятия материала.

Для исследования на демодекоз в лабораторию направляют:

- содержимое 3-5 узелков диаметром от 1 до 18 мм, при отсутствии узелков – соскобы с кожи;

- от консервированных кож крупного рогатого скота, овец, коз и свиней – соскобы с пятен, расположенных в области головы, шеи, плеча, лопаток, боков, спины.

Перед отбором материала у крупного рогатого скота, овец, коз, свиней и собак выстригают волосяной покров вокруг узелков, дезинфицируют кожу 0,5%-ным раствором карболовой кислоты и делают кровопускательной иглой прокол узелка на глубину 1-3 мм. Пальцами захватывают узелок так, чтобы ранка была в центре, выдавливают сметанообразное содержимое, вытаскивают иглу и мандреном выталкивают содержимое из полости иглы в стеклянный флакон с 0,5 см³ вазелинового, растительного масла или физиологического раствора и закрывают пробкой.

Дерматомикозы

От животных, больных дерматомикозами (стригущий лишай, парша), патологический материал берут с периферии очагов поражения, не подвергавшихся медикаментозному лечению. Корочки с остатками волос, волосы выдергивают пинцетом из пораженных участков (по возможности менее загрязненных) и помещают в стеклянную баночку с крышкой. Образцы снабжают этикеткой с указанием области, района, хозяйства, возраста и степени поражения животного, а также даты взятия материала и доставляют для исследования в лабораторию.

Отбор и транспортировка рыб для бактериологического, вирусологического, паразитологического и химико-токсикологического исследования.

Больных или подозрительных по заболеванию инфекционными и инвазионными болезнями рыб доставляют в лабораторию в живом виде.

Для исследования отбирают 10-20 рыб с явно выраженными клиническими признаками болезни, согласно МУ по паразитологическому исследованию рыб № 044-3 от 31.01.90 г.

Рыб перевозят в чистых молочных бидонах, ваннах или других емкостях, предназначенных для перевозки живой рыбы, заполненных на 3/4 объема водой из того же

водоема, откуда взята рыба, или из артезианской скважины. Рыба, доставленная в лабораторию в бумаге, марле и др. упаковочных материалах, для исследования не пригодна. Летом при длительной транспортировке воду с рыбой постепенно охлаждают до температуры 12-15°С, добавляя кусочки льда. Чтобы не вызвать температурного шока и простудных явлений, нельзя пересаживать рыбу в воду, имеющую температуру ниже, чем в водоеме (на 7°С и более).

При отсутствии возможности доставить живую рыбу, у крупных рыб берут кусочки пораженных органов и тканей, помещают их в стерильную стеклянную посуду, заливают

стерильным 40%-ным водным раствором глицерина, закрывают пробкой, заливают парафином и направляют с нарочным в лабораторию. Жидкий патологический материал (кровь, экссудат и др.) доставляют в лабораторию в запаянных стерильных пастеровских пипетках.

Летом патологический материал пригоден для бактериологического исследования в течение 2 часов после его взятия.

Для исследования на инвазионные заболевания рыбу доставляют в живом или свежеуснувшем виде.

Для химико-токсикологических исследований в лабораторию доставляют живых или недавно погибших рыб, не менее 5 экземпляров каждого вида. Одновременно направляют рыб того же вида из благополучного водоема для контрольных исследований. Если доставить живых или свежеуснувших рыб невозможно, а также в теплое время года, рыб охлаждают на льду, промораживают.

Отбор материала от трупов павших и больных животных при подозрении на отравление.

При подозрении на отравление животных в лабораторию направляют материал от трупов павших животных для химических исследований. Одновременно с целью определения источника отравления посылают все корма (по 1 кг каждого вида корма), которые скармливали животному, с указанием периода скармливания каждого вида корма. Кроме этого, обязательно посылают остатки кормов из кормушки.

Для химических исследований в лабораторию посылают в отдельных банках следующий материал:

а) часть пищевода и пораженную часть желудка с содержимым (в количестве 0,5 кг), а от крупного и мелкого рогатого скота – часть пищевода и сычуга и содержимое из разных мест сычуга, рубца (по 0,5 кг).

Желудок и его содержимое берут в следующем порядке.

При вскрытии трупа после осмотра внутренних органов перевязывают лигатурами пищевод и двенадцатиперстную кишку вблизи стенки желудка (в двух местах по две перевязки) и перерезают между перевязками. Желудок извлекают и кладут в чистую стеклянную посуду (от крупных животных на чистое место), затем вскрывают его по передней стенке.

Содержимое желудка предварительно (не выбирая из желудка) перемешивают, после чего осторожно, чтобы не загрязнить, берут часть его. Для перемешивания нельзя использовать металлические предметы;

б) отрезок тонкого отдела кишечника (длиной до 0,5 м) из наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);

в) отрезок толстого отдела кишечника (длиной до 40 см) из наиболее пораженной части вместе с содержимым (до 0,5 кг);

г) часть печени (0,5-1 кг) с желчным пузырем (от крупных животных), а от мелких животных печень целиком;

д) одну почку;

е) мочу в количестве 0,5 л;

ж) скелетную мускулатуру в количестве 0,5 кг;

Кроме того, в зависимости от особенностей предполагаемого отравления дополнительно посылают:

при подозрении на отравление метгемоглобинобразующими ядами (нитритами, нитратами с их редукцией в нитриты, бертолетовой солью, красной кровяной солью и др.) - сгуски крови 10 мл;

при подозрении на отравление через кожу (in vivo) – часть кожи, клетчатки и мышцы из места предполагаемого введения яда;

при подозрении на отравление газами – наиболее полнокровную часть легкого (в количестве 0,5 кг), трахею, часть сердца, 200 мл крови, часть селезенки и головного мозга. От мелких животных (в том числе и от птиц) берут органы целиком.

При вскрытии отрытого из земли трупа животного надо взять: сохранившиеся внутренние органы в количестве до 1 кг, скелетную мускулатуру в количестве 1 кг, землю под трупом 0,5 кг из двух-трех мест.

Для гистологического исследования посылают небольшие кусочки, размером 1×3×5 см, следующих органов: печени, почек (обязательно с наличием коркового и мозгового слоев), сердца, легкого, селезенки, языка, пищевода, желудка, тонкого и толстого отделов кишечника, скелетной мускулатуры, лимфоузлов, головного мозга (половину мозга в стерильной банке).

Кусочки должны быть взяты из различных участков органов на границе пораженной и непораженной части ткани и тотчас же помещены в 10%-ный раствор формалина из расчета на 1 часть патологического материала 15 частей раствора формалина.

При подозрении на отравление веществами, употребляемыми для борьбы с сельскохозяйственными вредителями, минеральными удобрениями, зооцидами посылают пробу их в количестве от 100 до 1000 г. В случае отсутствия этих веществ на момент отправки в лабораторию необходимо в сопроводительных документах указать их название.

От больных животных при подозрении на отравление посылают: рвотные массы, желательно первые порции; мочу – все количество, которое удалось получить; кал – в количестве 0,5 кг; содержимое желудка, полученное через пищевой зонд; корма и вещества, которые могли явиться причиной отравления. При подозрении отравления нитратами, нитритами дополнительно посылают слюну, носовую слизь (сколько получается отобрать), цельную кровь (со стабилизатором) 10 мл.

При подозрении, что отравление наступило вследствие поедания ядовитых растений, берут для ботанического анализа пробы растений в следующем порядке: деревянную рамку с внутренним размером 1 м² накладывают на травостой луга или пастбища в местах выпаса скота; все оказавшиеся внутри рамки растения срезают под корень. Если травостой однотипный, пробу с 1 га луга или пастбища берут в 3-5 местах, а если травостой разнотипный, количество проб увеличивают с целью большего охвата различных растений и посылают среднюю пробу.

Если пробу трав, взятых для исследования, можно доставить в лабораторию в течение нескольких часов, то траву посылают в сыром виде; при длительной пересылке пробы сушат и доставляют в сухом виде. Пересылают пробы трав в коробках, но не в полиэтиленовых пакетах.

Пробы должны быть взяты ветеринарным специалистом или зоотехником.

Материал, взятый для химических исследований, нельзя обмывать и держать вместе с металлическими предметами; его отправляют в чистом, не консервированном виде.

Упаковывают материал в чистые, широкогорлые стеклянные банки, плотно закрывающиеся стеклянными притертыми пробками, а при отсутствии их – чистыми, не бывшими в употреблении полиэтиленовыми крышками или чистой вощеной бумагой.

Поверх крышки банку обертывают чистой бумагой, обвязывают тонким шпагатом (или толстой крепкой ниткой), концы которого приклеивают этикеткой с печатью организации и подписью специалиста, отобравшего материал. На каждую банку наклеивают еще этикетку, на

которой записывают, какие органы, и в каком количестве (по весу) помещены в банку, вид и кличку животного, дату падежа и вскрытия трупа животного, указывают, какое подозревается отравление и кому принадлежит животное.

Взятый материал должен быть отправлен в лабораторию немедленно с нарочным. При подозрении на отравление нитратами, нитритами, синильной кислотой патологический материал необходимо доставить в течение 2 часов после смерти животного.